一、细胞基本属性
- 细胞名称：人膀胱癌相关成纤维细胞（Human Bladder Cancer - Associated Fibroblasts）
- 细胞别称：BCAF；肿瘤相关成纤维细胞；CAFs
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：膀胱癌患者（性别不限，供体经病理确诊且无其他系统并发症）
- 组织来源：膀胱癌组织（手术切除样本，经病理学验证）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白基质）
- 细胞形态：长梭形或星形，细胞质伸展明显
- 细胞代数：P3 - P8（保证肿瘤微环境相关表型稳定性）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + bFGF生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（与肿瘤微环境模拟条件相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后，离心去除冻存液，加入5mL预热培养基重悬
- 培养瓶：酒精消毒外表面，静置培养箱4小时后首次换液
- 传代标准：细胞融合度达90% - 95%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA，37℃消化3 - 5分钟，离心后完全去除消化酶
- 注意事项：避免机械刮取损伤细胞，传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 3×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：消化后离心收集细胞，冻存液重悬后分装至冻存管，程序降温盒转移至 - 80℃过夜后转入液氮
- 复苏验证：
- 复苏后48小时进行α - SMA免疫荧光鉴定（确认肌成纤维细胞表型）
- 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应维持基质重塑功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输温度异常导致细胞失活（需提供温度记录证明）
2. 72小时内证实真菌/支原体污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞存活率低于85%（台盼蓝染色法复检）
4. 基因表达谱与说明书标注不符
- 不予重发情形：
1. 客户未按推荐密度接种导致细胞老化
2. 自行修改培养基配方影响细胞特性
3. 液氮保存不当导致冻存管破裂
4. 未进行细胞身份鉴定直接用于论文数据
