一、细胞基本属性
- 细胞名称：人肾成纤维细胞（Human Renal Fibroblasts）
- 细胞别称：HRF；肾间质成纤维细胞；肾纤维母细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肾脏疾病史）
- 组织来源：肾组织间质区域
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或明胶包被培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或星形，贴壁伸展后呈放射状排列
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能活性与遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Fibroblast Growth Medium（含10% FBS + 成纤维细胞特异性生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖培养密度与基质包被条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱4小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 首次传代建议保留原代培养基10%体积以维持适应性
- 避免频繁观察导致的温度与CO₂浓度波动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温盒梯度冷冻：4℃ 30min → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时进行α - SMA免疫荧光鉴定（纯度≥95%）
- 功能验证：胶原分泌量检测（P5代细胞应维持基质合成能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输温度记录异常且复苏存活率＜85%（需提供温度监控截图）
2. 5天内证实支原体污染（需提供荧光染色法检测结果）
3. 细胞特异性标志物表达缺失（需提供流式检测数据）
- 不予重发情形：
1. 未使用配套基质包被培养器皿导致贴壁失败
2. 擅自添加TGF - β等细胞因子诱导转分化
3. 超过建议代次（P8）后出现的功能衰减
