一、细胞基本属性
细胞名称
人前列腺成纤维细胞(Human Prostatic Fibroblasts)
细胞别称
HPF;前列腺基质成纤维细胞;前列腺间质成纤维细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无前列腺疾病史)
组织来源
前列腺间质组织
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
细胞形态
典型长梭形或星状,贴壁后伸展形成网状结构
细胞代数
P3 - P8(保持功能活性与遗传稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
成纤维细胞专用培养基(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 72小时(与细胞密度及培养基批次相关)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭后静置培养箱4小时平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
- 避免消化时间过长(防止细胞膜损伤)
- 首次传代后48小时内避免频繁观察扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心收集细胞后重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 转入液氮
复苏验证
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应维持基质合成能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 5天内证实支原体/真菌污染(需提供检测报告)
3. 复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
4. STR分型与备案信息不符
不予重发情形
1. 客户超72小时未复苏细胞
2. 自行更换培养基导致功能异常
3. 未按规范进行胶原包被预处理
4. 未定期检测细胞污染状态
以上内容基于标准化操作流程制定,具体实验需结合实验室条件优化。