一、细胞基本属性
- 细胞名称:人膀胱平滑肌细胞(Human Bladder Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:HBSMC;膀胱平滑肌细胞;逼尿肌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无泌尿系统疾病史)
- 组织来源:膀胱组织平滑肌层
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白基质包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形,融合后呈束状或旋涡状排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保收缩功能与标志物表达稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含5% FBS + SMC生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(受细胞密度与培养基活性影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止(加入含血清培养基)。
- 注意事项:避免消化时间过长(损伤收缩蛋白结构);传代后12小时建议更换新鲜培养基以去除细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃ 过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:复苏后24小时内检测细胞存活率(台盼蓝染色法≥90%);功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞阳性率需≥95%)。
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
2. 3个工作日内确认细菌/真菌污染(需提供污染检测报告)。
3. 细胞存活率低于90%(经第三方检测确认)。
4. 标志物表达与说明书不符(需提供流式检测数据)。
- 不予重发情形
1. 客户未按规范进行细胞复苏(如超时或高温解冻)。
2. 使用非推荐培养基或未进行基质包被。
3. 未定期检测支原体导致实验污染扩散。
4. 人为操作失误导致细胞机械损伤。