一、细胞基本属性
细胞名称:人膀胱上皮细胞(Human Bladder Epithelial Cells)
细胞别称:HBlEpC;膀胱上皮细胞;尿路上皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无泌尿系统疾病史)
组织来源:膀胱组织上皮层
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白涂层等细胞外基质)
细胞形态:典型“铺路石样”单层,接触抑制后呈多边形
细胞代数:P3 - P8(经严格质控确保功能稳定性和遗传一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含2% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 72小时(与细胞密度及培养条件相关)
供应限制:仅限科研使用,不可用于临床治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准:融合度达80% - 90%(推荐每3 - 4天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(不含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
- 消化过程需轻柔吹打避免机械损伤
- 传代后12小时内更换新鲜培养基以清除残余酶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及蛋白保护剂)
细胞密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢加入预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后24小时进行台盼蓝染色检测(存活率≥90%)
- 功能验证:角蛋白免疫荧光鉴定(P5代细胞应保持典型上皮标志物表达)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供干冰余量证明)
2. 3日内经检测证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏后细胞存活率低于90%(台盼蓝染色法定量)
4. STR分型与数据库信息不符
不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过48小时
2. 自行更换培养基导致细胞形态异常
3. 未使用推荐基质进行传代培养
4. 未执行标准冻存程序导致细胞损伤
注:本产品需在生物安全二级实验室规范操作,所有实验废弃物应经高压灭菌处理。