一、细胞基本属性
细胞名称:人输尿管平滑肌细胞(Human Ureteral Smooth Muscle Cells)
细胞别称:HUSMC;输尿管平滑肌细胞;输尿管肌层细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无泌尿系统疾病史)
组织来源:输尿管组织中段平滑肌层
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形,融合后呈束状交错排列
细胞代数:P3 - P8(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS + 胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(与细胞密度及培养条件相关)
供应限制:仅限于基础研究使用,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后转移至含5mL培养基的离心管,1000rpm离心3分钟
- 培养瓶:酒精擦拭表面后置于培养箱静置4小时,待细胞贴壁后换液
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察到细胞间隙增大时立即终止
注意事项:
- 轻柔吹打避免机械损伤(平滑肌细胞对剪切力敏感)
- 传代后需添加2mM L - 谷氨酰胺促进细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 12h → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后48小时进行活率检测(台盼蓝染色法活率≥85%)
- 功能验证:钙离子荧光探针检测收缩功能(P5代细胞应保持钙响应特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 到货干冰完全挥发且温度记录> - 60℃(需提供包装照片及温度记录)
2. 7日内经qPCR证实支原体污染
3. 细胞α - SMA免疫荧光染色阳性率<80%(需提供检测图像)
不予重发情形:
1. 使用非标准培养基培养超过2代
2. 未按规范进行细胞消化导致膜蛋白损伤
3. 未在指定代数内完成关键功能验证实验