一、细胞基本属性
- 细胞名称:人肾小管上皮细胞(Human Renal Tubular Epithelial Cells)
- 细胞别称:HRTEpiC;肾小管上皮细胞;肾小管细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
- 组织来源:肾皮质近曲小管段
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原或明胶包被表面)
- 细胞形态:单层铺路石状,融合后呈多角形或鹅卵石样排列
- 细胞代数:P3 - P8(维持肾小管上皮极性及转运功能)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:肾上皮细胞专用培养基(含5% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度及基质包被条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭外壁后静置培养箱平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.05%胰蛋白酶 - EDTA溶液(无钙镁离子),37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免过度消化导致细胞极性丧失
- 传代后12 - 24小时内更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:钠 - 葡萄糖协同转运蛋白(SGLT)活性检测(P5代细胞应维持生理转运功能)
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供干冰余量及包装状态证明)
2. 3天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
4. STR鉴定结果与申明不符
- 不予重发情形
1. 客户延迟复苏超过72小时
2. 使用非推荐培养基或未进行基质包被
3. 反复冻融导致细胞功能损伤
4. 未按规范进行支原体检测即开展后续实验
(注:以上内容基于标准操作流程,具体实验条件需根据研究需求优化。)