一、细胞基本属性
- 细胞名称：人结肠癌相关成纤维细胞（Human Colorectal Cancer-Associated Fibroblasts）
- 细胞别称：CAFs；肿瘤相关成纤维细胞；间质成纤维细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：结肠癌患者（性别及年龄信息经伦理审核匿名化处理）
- 组织来源：结肠癌组织间质分离的原代细胞
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤状，典型放射状排列
- 细胞代数：P3 - P10（经STR鉴定确保遗传稳定性）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 碱性成纤维细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：程序降温冻存液（含DMSO及血清替代物），液氮气相长期保存
- 倍增时间：约36 - 60小时（与肿瘤微环境模拟条件相关）
- 供应限制：仅供肿瘤微环境研究，不可用于药物筛选或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（接触抑制后需及时传代）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔拍打促使细胞脱落
- 注意事项
- 维持细胞外基质包被以保持活化表型
- 传代后48小时内避免频繁观察防止扰动贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清程序降温冻存液（含5% DMSO + 海藻糖）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 程序降温仪按每分钟降1℃至 - 80℃，后转移至液氮
- 复苏验证
- 复苏后72小时检测α - SMA表达（流式细胞术≥90%）
- 功能验证：ELISA检测IL - 6基础分泌量（P5代细胞应保持肿瘤支持特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程温度记录异常导致细胞团碎裂
2. 7天内经qPCR证实交叉污染
3. 细胞增殖能力缺失（传代3次内未达对数生长期）
4. 特定标志物检测与质检报告不符
- 不予重发情形
1. 使用非包被培养器皿导致细胞去分化
2. 自行添加细胞因子改变表型特征
3. 未按要求进行肿瘤细胞共培养验证
4. 超过建议代次使用导致功能衰减
注：所有参数均基于本批次细胞质检报告，建议收到细胞后3个月内完成关键实验
