一、细胞基本属性
- 细胞名称：人肝门静脉成纤维细胞（Human Hepatic Portal Vein Fibroblasts）
- 细胞别称：HHPVF；肝门静脉基质细胞；门静脉成纤维细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肝脏疾病史）
- 组织来源：肝门静脉组织中膜层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原基质贴附）
- 细胞形态：长梭形或多角形，可呈现平行排列或漩涡状生长
- 细胞代数：P3 - P10（经STR鉴定确保遗传稳定性）
- 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含血清型冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含10% FBS + 1%双抗 + 2mM谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：程序降温冻存液（含10% DMSO及胎牛血清），液氮气相长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（与细胞密度及血清批次相关）
- 供应限制：仅用于基础研究，禁止临床或体内移植应用
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴轻柔摇晃解冻，离心去冻存液后重悬接种
- 培养瓶：酒精消毒外壁，静置培养箱4小时后换液
- 传代标准：融合度达90% - 95%（接触抑制明显时需及时传代）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - 0.02% EDTA混合液，37℃消化3 - 5分钟，离心后完全去除消化酶
- 注意事项
- 首次换液需保留50%原培养基维持适应性
- 传代后48小时内避免频繁观察扰动细胞贴附
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：胎牛血清基础冻存液（含10% DMSO + 20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：预冷冻存管至4℃，细胞悬液分装后立即转入程序降温盒，梯度冷冻：-80℃过夜后转移至液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏24小时后检测细胞贴壁率（标准≥85%）
- 功能验证：Ⅰ型胶原分泌检测（P5代细胞ELISA值应＞2μg/10⁶ cells）
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 到货干冰完全升华且细胞悬液出现结晶
2. 7日内经测序证实交叉污染（需提供STR图谱）
3. 原代细胞增殖能力缺失（传代3次未达对数期）
- 不予重发情形
1. 使用含生长因子添加剂诱导分化
2. 未按规范进行胶原酶消化导致细胞团块
3. 自行修改培养基血清浓度引发异常增殖
4. 超出建议代数（P10）后出现的功能衰退
