一、细胞基本属性
本产品为人肠微血管内皮细胞(Human Intestinal Microvascular Endothelial Cells),简称HIMEC,别称肠微血管内皮细胞或肠道内皮细胞,来源于健康成人(性别不限,经严格筛选排除肠道疾病史)的肠组织微血管段。细胞以贴壁方式生长,依赖细胞外基质成分,呈现典型的“鹅卵石样”单层形态,接触抑制后转为多角形结构。细胞代次范围为P3 - P8,确保功能稳定性和遗传一致性。
细胞规格提供两种选择:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)。培养基采用专用Endothelial Cell Medium(含2% FBS及内皮细胞生长因子添加剂),培养条件为5% CO₂、37℃恒温及95%湿度环境。冻存采用无血清冻存液(含DMSO及保护剂),长期保存需置于 - 150℃以下。细胞倍增时间约48 - 72小时,具体受培养密度及基质条件影响。本产品仅限科研用途,禁止用于临床或动物实验。
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻后与4mL预热培养基混匀;培养瓶收货后需酒精擦拭表面,静置培养箱2小时以平衡环境。
2. 传代标准:当细胞融合度达85% - 90%时进行传代(通常间隔3 - 4天),推荐接种密度为5×10³ cells/cm²,传代比例为1:2至1:3。
3. 消化方法:使用0.05%无钙镁Trypsin - EDTA,37℃消化1 - 2分钟,镜下观察细胞收缩变圆后立即终止消化。注意避免过度消化损伤细胞连接蛋白,传代后24小时内需更换培养基以清除残留酶。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配制:采用无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂),细胞冻存密度为1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
2. 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,梯度降温流程为4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→最终转移至液氮长期保存。
3. 复苏验证:复苏后需通过台盼蓝染色检测存活率(≥95%为合格),并行Transwell通透性检测确认P5代细胞的基础屏障功能。
四、售后服务承诺
1. 重发标准:若因运输温度异常(需提供干冰状态证明)、3日内证实污染(附PCR报告)、细胞活力低于90%或STR鉴定不符,将免费重发。
2. 不予重发情形:包括延迟复苏超72小时、使用非推荐培养基、反复冻融损伤或未规范检测支原体导致的实验问题。
注:以上内容严格遵循科研伦理规范,所有操作需符合实验室生物安全标准。