一、细胞基本属性
细胞名称
人结肠上皮细胞(Human Colon Epithelial Cells)
细胞别称
HCoEpiC;结肠黏膜上皮细胞;肠上皮细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无胃肠道疾病史)
组织来源
结肠黏膜组织(经内镜活检或手术取材)
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白或基底膜基质)
细胞形态
单层铺路石样排列,接触抑制后呈多边形紧密连接
细胞代数
P3 - P8(推荐使用代数,确保功能与遗传稳定性)
细胞规格
1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
专用上皮细胞培养基(含5% FBS + EGF + 胰岛素样生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约36 - 48小时(依赖细胞密度与基质条件)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙扩大后终止
注意事项
- 避免剧烈吹打(保护细胞间紧密连接结构)
- 传代后6小时内更换培养基以清除代谢废物
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P5代细胞活性应≥80%)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 5天内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供培养24小时显微照片)
4. 基因表达谱与申报数据不符
不予重发情形
1. 解冻后未在48小时内启动培养流程
2. 使用非指定培养基导致细胞分化异常
3. 超代次使用(超过P10代仍要求功能保证)
4. 未按操作规范导致细胞污染扩散