一、细胞基本属性
- 细胞名称:人腹膜微血管内皮细胞(Human Peritoneal Microvascular Endothelial Cells)
- 细胞别称:HPMEC;腹膜微血管内皮细胞;腹膜内皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无腹膜病变史)
- 组织来源:腹膜组织微血管段
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型单层铺路石样排列,接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数:P3 - P8(经功能验证确保代谢活性稳定)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:专用内皮细胞培养基(含2% FBS + 内皮细胞生长因子及肝素)
- 培养条件:气相为5% CO₂与95%空气混合环境,恒温37℃,湿度95%
- 冻存条件:无血清程序冻存液(含DMSO及细胞膜稳定剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(与培养密度及基质微环境相关)
- 供应限制:仅用于基础研究,禁止临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速复温,加入预温培养基轻柔混悬;培养瓶经酒精消毒后静置培养箱1小时再观察。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%时进行(通常培养周期3 - 5天)。
- 传代比例:建议1:2至1:3分种(最低接种密度4×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:采用0.05%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化1.5 - 2分钟,显微镜下见细胞间隙增大立即中和。
- 关键要点:消化时间精确控制防止紧密连接损伤;传代后12小时内避免移动培养器皿,48小时完成首次换液。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配置:专用无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)。
- 细胞密度:推荐冻存浓度1.2×10⁶ - 1.8×10⁶ cells/mL。
- 冻存程序:离心后轻柔重悬细胞,分装至冻存管执行梯度降温:4℃平衡30分钟→ - 20℃预冷2小时→ - 80℃过夜→液氮长期存储。
- 质控验证:复苏后活率≥90%(台盼蓝染色法);屏障功能通过FITC - 葡聚糖渗透实验验证(P5代细胞跨膜电阻值≥15Ω·cm²)。
四、售后服务承诺
- 质量保障:细胞发货前完成STR鉴定、支原体检测及活力测试,随附电子版质检报告。
- 重发条款:符合以下情形可申请重发(需48小时内提供证据):
1. 运输过程干冰耗尽导致细胞失活
2. 到货72小时内检出微生物污染
3. 复苏活率低于承诺标准
4. 细胞种属鉴定不符
- 免责声明:以下情况不予重发:
1. 收货后超72小时未及时复苏
2. 自行更换培养基或生长基质引发异常
3. 违反操作规范导致的反复冻融损伤
4. 未执行污染监测直接进行共培养实验