一、细胞基本属性
细胞名称
人肠系膜动脉平滑肌细胞(Human Mesenteric Artery Smooth Muscle Cells)
细胞别称
HMA - SMC;肠系膜动脉平滑肌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体无心血管疾病史)
组织来源
肠系膜动脉中膜层
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被的培养表面)
细胞形态
长梭形或纺锤形,融合后呈典型“峰谷”样排列
细胞代数
P3 - P8(保持收缩功能与表型稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS + 生长因子组合)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约72 - 96小时(依赖培养密度及血清浓度)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
· 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基离心重悬
· 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时再换液
传代标准
细胞融合度达90% - 95%(通常每5 - 7天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法
· 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
· 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞回缩后终止消化
注意事项
· 避免机械刮取(保护细胞膜完整性)
· 传代后48小时内避免频繁观察以降低代谢扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
· 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
· 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
· 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
· 功能验证:钙离子荧光探针检测收缩响应(P5代细胞需维持钙信号活性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
2. 5天内确认支原体/真菌污染(需提供qPCR检测结果)
3. 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
4. α - SMA免疫荧光鉴定未通过
不予重发情形
1. 解冻后超72小时未进行贴壁培养
2. 使用非指定培养基或自行添加生长因子
3. 未按规范进行胶原包被导致细胞脱落
4. 未定期检测细胞收缩功能而直接用于实验
(注:以上内容基于标准操作流程,具体实验条件需根据研究需求优化。)