一、细胞基本属性
- 细胞名称:人肛门上皮细胞(Human Anal Epithelial Cells)
- 细胞别称:肛管上皮细胞;直肠末端上皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肛门及肠道疾病史)
- 组织来源:肛门组织(取自手术切除的健康组织样本)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或特定细胞外基质包被)
- 细胞形态:典型“铺路石样”单层排列,接触抑制后呈规则多边形
- 细胞代数:P3 - P8(确保细胞分化功能与增殖活性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:角质形成细胞专用培养基(含2% FBS + 表皮生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(受培养密度及基质影响)
- 供应限制:仅供科学研究,不可用于临床、药物或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后转移至含5mL培养基的离心管,离心去冻存液,重悬接种。
- 培养瓶:表面酒精消毒后静置于培养箱2小时,稳定后换液。
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,加入含血清培养基终止反应。
- 注意事项:避免消化过度导致细胞膜损伤;传代后6小时内避免移动培养瓶以促进贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及蛋白稳定剂)
- 细胞密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL(高密度冻存提升复苏效率)
- 冻存步骤:离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管,按程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证:复苏后48小时内检测细胞活力(台盼蓝染色≥90%);功能验证包括角蛋白免疫荧光染色(确认上皮细胞特性)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程中干冰耗尽或温度异常(需提供物流记录及包装照片);
2. 到货3日内证实微生物污染(需提供第三方检测报告);
3. 复苏后细胞存活率低于85%(需提供染色结果及显微镜图像);
4. 细胞STR谱系与数据库不匹配。
- 不予重发情形:
1. 未按规范在48小时内复苏细胞;
2. 自行更换培养基或添加剂导致细胞功能异常;
3. 实验操作污染未及时反馈;
4. 未保留原始冻存管或培养瓶作为争议证据。
注:内容依据科研级原代细胞标准流程编写,实验操作需符合生物安全规范。