一、细胞基本属性
细胞名称
人胃癌相关成纤维细胞（Human Gastric Cancer-Associated Fibroblasts）
细胞别称
HGCAF；胃CAF；胃癌间质成纤维细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
胃癌患者（性别及年龄依供体样本信息，经病理确诊）
组织来源
胃癌组织间质（肿瘤浸润区域，经病理分型确认）
生长特性
贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态
长梭形或星形，胞质伸展明显，无接触抑制特性
细胞代数
P3 - P10（经功能验证确保活性及表型稳定性）
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 碱性成纤维细胞生长因子）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 60小时（依赖肿瘤微环境模拟条件）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达90% - 95%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例
1:3至1:4（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.1%胶原酶）
37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
避免机械刮取（防止细胞外基质成分丢失）
传代后12小时补充新鲜培养基以维持旁分泌功能
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及能量代谢保护剂）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
胰酶消化后离心收集，重悬于预冷冻存液
梯度降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期存储
复苏验证
复苏后48小时检测细胞贴壁率（≥85%为合格）
功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞应保持肌成纤维细胞表型）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常且复苏失败（需提供物流温度监控截图）
2. 7天内证实支原体污染（需提供荧光PCR检测结果）
3. 细胞增殖能力缺失（需提供连续3天生长曲线数据）
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形
1. 客户自行更改培养基成分导致功能异常
2. 未使用推荐胶原包埋培养器皿
3. 实验操作污染（如共培养体系引入其他细胞）
4. 超过建议代数（P10）仍要求性能担保
