一、细胞基本属性
- 细胞名称：人肝纤维母细胞（Human Hepatic Fibroblasts）
- 细胞别称：肝星状细胞；肝成纤维细胞；Hepatic Fibroblasts
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肝脏疾病史）
- 组织来源：肝脏组织（经胶原酶消化法分离自肝窦间隙）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原基质或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：长梭形或不规则星状，活化后胞体伸展并分泌基质蛋白
- 细胞代数：P3 - P8（维持功能活性及低传代变异风险）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Fibroblast Growth Medium（含10% FBS + 碱性成纤维细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（与细胞活化状态及培养密度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（活化状态细胞增殖速率提升）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.1%胶原酶辅助消化）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止
- 注意事项：
- 活化后细胞易聚集成团，需充分吹打成单细胞悬液
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以防干扰贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬细胞于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞应表达活化标志物）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供检测报告）
3. 细胞贴壁率低于80%（经标准培养条件验证）
4. STR比对结果与数据库不符
- 不予重发情形：
1. 超时复苏（超过推荐复苏窗口期）
2. 自行更改培养基成分导致功能异常
3. 未按规范进行细胞活化前处理
4. 实验操作污染导致交叉感染
