一、细胞基本属性
- 细胞名称：人肝癌相关成纤维细胞（Human Hepatocellular Carcinoma-Associated Fibroblasts）
- 细胞别称：HCCAF；肝癌CAFs；肿瘤相关成纤维细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体经病理学确诊为肝癌组织来源）
- 组织来源：肝癌组织微环境（经病理分选确认的成纤维细胞群体）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或星形，细胞质延展明显，核质比适中
- 细胞代数：P3 - P8（经α - SMA及FAP免疫荧光验证功能活性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 肝细胞生长因子及TGF - β抑制剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及凋亡抑制剂），液氮长期保存
- 倍增时间：48 - 72小时（与肿瘤微环境模拟条件相关）
- 供应限制：仅限肿瘤微环境研究用途，不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管需37℃水浴快速解冻后离心去除冻存液，重悬于预热培养基；培养瓶经酒精消毒后静置培养箱4小时再换液。
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每5 - 7天传代，维持细胞活化状态）。
- 传代比例：1:2至1:3（接种密度建议3×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA，37℃消化3 - 5分钟，终止液需含10% FBS。
- 注意事项：避免频繁传代导致细胞衰老（P8代后可能出现增殖减缓）；培养过程需定期添加抗纤维化因子维持表型稳定。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及线粒体保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：离心后缓慢滴加冻存液重悬，程序降温盒梯度冷冻（ - 1℃/min）后转移至液氮。
- 复苏验证：存活率≥90%（台盼蓝法）；功能验证需检测胶原分泌能力（P5代细胞羟脯氨酸含量应＞2μg/10⁶ cells）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：液氮运输中温度异常（需提供物流温度记录）；到货72小时内经qPCR证实细胞污染；STR分型与备案数据不符。
- 不予重发情形：未使用指定胶原包埋培养器皿；自行添加未知细胞因子导致表型改变；超过推荐代数使用导致功能退化。
