一、细胞基本属性
- 细胞名称：人肝癌细胞（Human Hepatocellular Carcinoma Cells）
- 细胞别称：HepG2；HCC细胞；肝母细胞瘤细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：成年患者（来源明确，临床病理信息可追溯）
- 组织来源：肝癌组织或转移病灶
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样，高核质比，部分呈现不规则铺路石样排列
- 细胞代数：P3 - P10（确保遗传稳定性与功能性表达）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶 或 1mL冻存管（含血清型冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS + 1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（10% DMSO + 90%培养基），-150℃液氮长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖传代密度与培养基活性）
- 供应限制：仅供体外研究使用，禁止临床应用或转基因操作
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：表面消毒后静置4小时再换液，减少运输应激。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁紧密时需及时传代）
- 传代比例：1:3至1:6（建议初始密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶）。
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落。
- 注意事项：
- 避免消化过度（易导致细胞团块聚集）。
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少机械扰动。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：90%基础培养基 + 10% DMSO（含5%胎牛血清）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管。
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测存活率（台盼蓝染色≥85%）。
- 功能验证：CCK - 8法检测增殖曲线（P5代应维持高增殖活性）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）。
2. 到货7天内证实真菌/细菌污染（需第三方检测报告）。
3. 细胞贴壁率低于70%（提供培养24小时显微照片）。
4. STR分型与数据库不匹配。
- 不予重发情形：
1. 未按说明书预包被培养器皿导致贴壁失败。
2. 自行更换培养基成分引发细胞状态异常。
3. 超代次使用（P10以上）导致功能缺失。
4. 未执行无菌操作造成的交叉污染。
