一、细胞基本属性
- 细胞名称:人食管纤维瘤细胞
- 细胞别称:食管纤维瘤细胞;食管成纤维细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无食管疾病史)
- 组织来源:食管纤维瘤组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质成分)
- 细胞形态:长梭形或成纤维细胞样,贴壁后呈放射状排列
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS + 1%双抗 + 成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与传代条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基混匀离心后重悬
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱2小时平衡后换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
- 注意事项:
- 避免消化过度(防止细胞膜损伤)
- 传代后12 - 24小时更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及蛋白稳定剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%)
- 功能验证:细胞增殖能力检测(P5代细胞应维持稳定生长曲线)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程中温度异常导致细胞死亡(需提供干冰融化证据)
2. 收到后72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测图像)
3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
4. STR鉴定与备案信息不符
- 不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过48小时
2. 使用非指定培养基或血清导致细胞状态异常
3. 未按规范进行传代或冻存操作
4. 未在生物安全柜内操作引发交叉污染
注:以上内容基于科研级细胞通用规范编写,具体操作请结合实验室安全规程。