一、细胞基本属性
- 细胞名称:人胆囊平滑肌细胞(Human Gallbladder Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:HGBSMC;胆囊平滑肌细胞;胆囊肌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无胆囊疾病史)
- 组织来源:胆囊组织平滑肌层
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质成分)
- 细胞形态:典型长梭形,平行排列成束状,接触抑制后呈交织状
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含10% FBS + 平滑肌细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养密度与基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭后静置培养箱2小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞收缩脱落后立即终止
- 注意事项:
- 避免机械刮取损伤细胞膜完整性
- 传代后48小时内避免频繁换液
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 转入液氮
- 复苏验证:
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持收缩蛋白表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰状态照片)
2. 5天内证实支原体/细菌污染(需提供PCR检测报告)
3. 细胞活力低于85%(台盼蓝染色法)
4. STR鉴定与宣传不符
- 不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过72小时
2. 使用非推荐培养基导致细胞分化异常
3. 未按规范进行胶原酶辅助消化引发细胞损伤
4. 未执行α - SMA标记验证即开展功能实验