一、细胞基本属性
- 细胞名称:人胆囊成纤维细胞(Human Gallbladder Fibroblasts)
- 细胞别称:HGBF;胆囊基质细胞;胆囊纤维母细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无胆囊疾病史)
- 组织来源:胆囊组织基质层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或星形,胞质伸展明显,贴壁后呈放射状排列
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数以保证分泌功能稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS + 双抗 + 生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(与细胞密度及培养基活性相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热培养基离心后重悬接种
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化
注意事项
- 避免过度传代导致表型漂移(建议不超过P8代)
- 传代后12小时更换培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度
1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL(离心后重悬)
冻存步骤
梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:胶原分泌能力检测(P5代细胞应保持活性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(提供接种后24小时显微照片)
4. 细胞STR谱系与数据库不匹配
不予重发情形
1. 未按说明书要求进行胶原包被预处理
2. 使用非推荐消化酶导致细胞损伤
3. 培养过程中频繁开盖引发污染
4. 超过建议代数仍要求功能质控
注:本产品严格遵循生物安全规范,操作前请阅读完整说明书并穿戴防护装备