一、细胞基本属性
- 细胞名称:人直肠平滑肌细胞(Human Rectal Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:HRSMC;直肠平滑肌细胞;肠道平滑肌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
- 组织来源:直肠组织平滑肌层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白基质)
- 细胞形态:长梭形单极或双极形态,融合后呈束状平行排列
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含5% FBS + 平滑肌细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(依赖培养密度与基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基混匀后离心重悬。
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡2小时。
- 传代标准:细胞融合度达85% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺);37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:避免消化过度(可能损伤细胞收缩功能);传代后24小时更换培养基以去除残留酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液;梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 转入液氮。
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)。
- 功能验证:钙离子荧光标记检测收缩功能(P5代细胞应维持基础收缩能力)。
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输温度失控导致细胞死亡(需提供干冰状态证明)。
2. 3天内证实支原体/细菌污染(需提供检测报告)。
3. 细胞活力低于90%(台盼蓝染色法)。
4. STR鉴定与宣传不符。
- 不予重发情形
1. 客户延迟复苏超过72小时。
2. 使用非推荐培养基导致功能异常。
3. 反复冻融或机械损伤细胞。
4. 未按规范检测支原体即开展实验。