一、细胞基本属性
- 细胞名称:人直肠上皮细胞(Human Rectal Epithelial Cells)
- 细胞别称:HREC;直肠黏膜上皮细胞;结肠末端上皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
- 组织来源:直肠黏膜组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈紧密镶嵌多边形
- 细胞代数:P3 - P8(经STR鉴定确保遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:EpiCM培养基(含2% FBS + 上皮细胞特异性生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(受细胞密度及基质影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:酒精擦拭外壁后静置培养箱1小时适应环境
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3天观察一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含钙离子螯合剂)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 消化过程中轻拍培养瓶侧壁促进细胞脱落
- 首次换液需在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1.5×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢加入预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃ 24h → 液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞贴壁率(应≥90%)
- 功能验证:跨膜电阻检测(P5代细胞TEER值≥200Ω·cm²)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
2. 到货72小时内检出微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法复检确认)
4. 细胞STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
1. 解冻后超48小时未进行贴壁培养
2. 擅自使用非推荐消化酶导致细胞损伤
3. 未按要求进行胶原包直接接种
4. 未执行标准传代流程导致细胞老化