一、细胞基本属性
细胞名称:人肝成纤维细胞(Human Hepatic Fibroblasts)
细胞别称:肝间质细胞;肝星状细胞;Hepatic Stromal Cells
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肝脏疾病史)
组织来源:肝脏组织间质
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或星状,胞质伸展明显
细胞代数:P3 - P10(经功能验证确保活性及表型稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用无血清冻存液)
培养基:Fibroblast Growth Medium(含10% FBS + 成纤维细胞特异性添加因子)
培养条件:恒温37℃;气相环境5% CO₂;相对湿度95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),长期保存需置于液氮( - 150℃以下)
倍增时间:约48 - 60小时(与传代密度及培养基批次相关)
供应限制:仅供体外研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶经表面消毒后静置2小时再移入培养箱。
传代标准:细胞融合度达90% - 95%时进行传代(建议培养周期不超过5天)。
传代比例:按1:2至1:3分瓶(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)。
消化方法:采用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后立即用含血清培养基终止。
注意事项:消化时间需精准控制以防止细胞膜损伤;传代后首次换液需在6小时内完成以去除细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存基液(含10% DMSO及糖原保护剂)。
细胞密度:推荐冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL。
冻存步骤:离心收集细胞后与冻存液混合,采用程序降温盒分阶段降温(4℃→ - 20℃→ - 80℃),最终转移至液氮长期储存。
复苏验证:复苏后活率需≥90%(台盼蓝染色法);功能检测包括胶原分泌能力验证(P5代细胞应保持Ⅰ型胶原合成功能)。
四、售后服务承诺
重发标准:运输过程温度异常(需提供物流温度记录);到货72小时内经检测存在微生物污染;细胞活率未达承诺标准;STR分型与备案信息不符。
免责情形:未按操作指南进行复苏或传代;使用非指定培养基培养;自行修饰细胞后出现功能异常;未在收货后规定时间内反馈问题。