一、细胞基本属性
- 细胞名称:人直肠成纤维细胞(Human Rectal Fibroblasts)
- 细胞别称:HRF;直肠成纤维细胞;肠道成纤维细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体无肠道疾病史)
- 组织来源:直肠组织黏膜下层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
- 细胞形态:长梭形或纺锤形,贴壁伸展后呈不规则星状
- 细胞代数:P3 - P8(维持功能稳定性与增殖活性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Fibroblast Growth Medium(含10% FBS + 成纤维细胞特异性添加因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(与培养密度及基质包被相关)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱2小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免消化时间过长(防止胞外基质蛋白降解)
- 传代后12小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时检测细胞存活率(台盼蓝染色法≥90%)
- 功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应保持基质合成能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 物流温控失效导致细胞死亡(需提供运输温度记录)
2. 到货3日内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法复检)
4. STR分型与备案信息不符
- 不予重发情形
1. 客户未按规范进行细胞复苏及传代操作
2. 使用非指定培养基导致细胞功能异常
3. 反复冻融或长期常温暴露造成细胞损伤
4. 未执行污染检测直接用于共培养实验