一、细胞基本属性
细胞名称：人肝Kupffer细胞（Human Liver Kupffer Cells）
细胞别称：肝巨噬细胞；肝脏定居巨噬细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肝脏疾病史）
组织来源：肝脏组织分离纯化
生长特性：贴壁生长（依赖特定基质或低粘附表面培养）
细胞形态：不规则圆形或梭形，表面带有伪足状突起
细胞代数：P2 - P6（保证功能活性与表型稳定性）
细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基：巨噬细胞专用培养基（含10% FBS + 细胞因子添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~72 - 96小时（增殖能力有限，功能以吞噬活性为主）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱1小时平衡
传代标准：细胞密度达70% - 80%（避免过度增殖导致功能下降）
传代比例：1:1至1:2（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
- 使用细胞刮或低浓度酶解液（如Accutase）
- 37℃轻柔振荡5 - 8分钟，镜下确认细胞脱离后终止
注意事项：
- 避免机械损伤（维持细胞表面受体完整性）
- 传代后48小时内避免换液以稳定细胞状态
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 转入液氮
复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色≥85%）
- 功能验证：荧光微球吞噬实验（P3代细胞吞噬效率应＞70%）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供温度记录证明）
2. 3天内证实微生物污染（需提供检测报告）
3. 细胞复苏存活率低于85%（经第三方检测确认）
4. 细胞标记物（CD68/CD163）表达不符
不予重发情形：
1. 客户未按推荐方法进行细胞活化处理
2. 使用非指定培养基导致功能异常
3. 冻存管反复冻融或长期未转入液氮
4. 实验操作不当导致细胞活性丧失（如过度消化）
