一、细胞基本属性
细胞名称：人肝窦内皮细胞（Human Liver Sinusoidal Endothelial Cells）
细胞别称：HLSEC；肝窦内皮细胞；肝血窦内皮细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肝脏疾病史）
组织来源：肝组织窦周微血管段
生长特性：贴壁生长（依赖Ⅳ型胶原包被培养器皿）
细胞形态：单层扁平铺展，呈现特征性窗孔结构
细胞代数：P3 - P8（严格质控保证功能稳定性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：专用内皮细胞培养基（含1% FBS + 肝窦内皮特需生长因子）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），液氮气相长期保存
倍增时间：约72 - 96小时（受培养密度及细胞外基质影响）
供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
· 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
· 培养瓶：酒精消毒表面后静置培养箱平衡1小时
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每5 - 7天传代）
传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
· 使用0.02%胶原酶Ⅳ型消化液
· 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后轻柔吹打收集
注意事项：
· 避免机械力损伤窗孔结构
· 传代后12小时补充新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及细胞膜稳定剂）
细胞密度：冻存浓度1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
· 离心去除消化液后缓慢滴加冻存液
· 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证：
· 复苏后48小时进行CD31免疫荧光鉴定
· 功能验证：低密度脂蛋白摄取实验（P5代细胞应保持特异性摄取能力）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 干冰运输链断裂导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 复苏存活率低于85%（台盼蓝染色复检确认）
4. 特异性标志物表达缺失
不予重发情形：
1. 超时复苏（到货后未及时处理超过48小时）
2. 自行更换培养基导致功能异常
3. 未按要求进行胶原包被预处理
4. 实验操作不当导致窗孔结构破坏
