一、细胞基本属性
- 细胞名称:人肝实质细胞(Human Hepatocytes)
- 细胞别称:肝细胞;肝实质细胞;肝主质细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肝脏疾病史)
- 组织来源:肝组织实质区域
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型多角形或立方形,胞质富含细胞器
- 细胞代数:P3 - P6(维持肝脏特异性功能表达)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:Hepatocyte Culture Medium(含5% FBS + 肝细胞生长因子复合添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清低温保护液(含10% DMSO), - 150℃深低温储存
- 倍增时间:约72 - 96小时(受细胞成熟度影响)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管复苏建议37℃水浴快速解冻后接种胶原包被培养皿
- 运输瓶需静置培养箱平衡4小时再换液
- 传代标准:细胞汇合度达80% - 85%(建议培养周期不超过5天)
- 传代比例:1:1至1:2(低密度接种维持细胞极性)
- 消化方法:
- 采用0.25%胰酶 - 胶原酶混合消化液
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲时终止
- 注意事项:
- 严格保持培养液pH值7.4±0.2
- 首次换液需保留50%原培养液维持细胞外基质
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:专用肝细胞冻存液(含海藻糖及血清替代物)
- 细胞密度:最佳冻存浓度1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 预冷程序降温盒( - 1℃/min速率降温)
- 梯度保存:4℃ 30min → - 80℃ 12h → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测白蛋白分泌量(≥5μg/10⁶ cells/24h)
- 尿素合成功能检测(P3代细胞应保持>80%初始活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 物流温度记录异常(< - 130℃或> - 60℃)
2. 7日内经ELISA检测证实细胞特异性功能缺失
3. 复苏存活率<85%(双染色法复核)
4. 细胞纯度<95%(CK18免疫荧光验证)
- 不予重发情形:
1. 未使用配套胶原包被培养器皿
2. 擅自添加肝毒性化合物未设对照组
3. 超代次使用(P7及以上)
4. 未按规范进行细胞去分化监测
注:本产品执行ISO细胞培养标准,所有批次均通过HBV/HCV病原体筛查及细胞功能认证