一、细胞基本属性
- 细胞名称：人肝内胆管上皮细胞（Human Intrahepatic Biliary Epithelial Cells）
- 细胞别称：HIBEC；肝胆管上皮细胞；胆管上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肝胆疾病史）
- 组织来源：肝内胆管组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或特定细胞外基质）
- 细胞形态：单层铺展时呈扁平多角形，融合后呈鹅卵石样排列
- 细胞代数：P3 - P8（维持功能性标志物表达及极性特征）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：胆管上皮细胞专用培养基（含2% FBS + EGF/HGF生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（依赖细胞密度及生长因子浓度）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于37℃培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.05%胰酶 - EDTA溶液（不含Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化
- 注意事项
- 避免消化过度（防止紧密连接蛋白降解）
- 首次换液建议在传代后12 - 24小时进行
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透压稳定剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后24小时内检测细胞存活率（台盼蓝染色法≥90%）
- 功能验证：CK19免疫荧光染色确认上皮特性（P5代细胞应维持标志物表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录证明）
2. 3个工作日内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 复苏后细胞存活率低于85%（需提供台盼蓝染色视频记录）
4. 细胞STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形
1. 未按说明书要求进行细胞复苏或传代操作
2. 使用非指定培养基或自行修改培养体系
3. 细胞冻存管经历多次冻融循环
4. 实验操作污染导致细胞状态异常
