一、细胞基本属性
- 细胞名称：人结肠成纤维细胞（Human Colon Fibroblasts）
- 细胞别称：HCF；结肠成纤维细胞；结肠基质细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无胃肠道疾病史）
- 组织来源：结肠组织黏膜下层或固有层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤连蛋白基质）
- 细胞形态：典型长梭形或不规则星形，具胞质突起，接触抑制后呈平行排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性与遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖培养密度与基质条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基混匀离心后重悬
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱平衡1 - 2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺），37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞脱离后立即终止
- 注意事项：
- 避免过度消化（损伤胞外基质结合位点）
- 传代后12小时补充新鲜培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞后重悬于冻存液，梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
- 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应维持基质合成功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 3天内证实细菌或真菌污染（需提供微生物检测报告）
3. 细胞复苏存活率低于90%（台盼蓝染色法）
4. STR基因分型与数据库不匹配
- 不予重发情形：
1. 客户延迟复苏超过48小时
2. 自行更换培养基导致细胞功能异常
3. 反复冻融或不当操作损伤细胞
4. 未按规范进行细胞鉴定直接用于实验
