一、细胞基本属性
- 细胞名称：人结肠平滑肌细胞（Human Colonic Smooth Muscle Cells）
- 细胞别称：HCSMC；结肠平滑肌细胞；结肠肌层细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无胃肠道疾病史）
- 组织来源：结肠组织平滑肌层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养表面）
- 细胞形态：典型长梭形或纺锤形，可见收缩特性
- 细胞代数：P3 - P8（维持功能性收缩能力与基因稳定性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：平滑肌细胞专用培养基（含5% FBS + 平滑肌细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约72 - 96小时（依赖培养密度与基质包被条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基混匀离心后接种
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后直接置入培养箱静置4小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（每5 - 7天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶），37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免机械吹打过度损伤收缩结构
- 传代后48小时内避免更换培养基以维持细胞基质沉积
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及低温保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液，梯度降温：4℃ 40min → -20℃ 4h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时进行活力检测（台盼蓝拒染率≥90%）
- 功能验证：钙离子荧光标记检测收缩反应（P5代细胞应保持钙响应能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输温度异常导致细胞失活（需提供温度记录证明）
2. 7日内经PCR证实支原体/真菌污染
3. 细胞复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色影像）
4. 免疫荧光鉴定平滑肌特异性标志物（如α - SMA）阴性
- 不予重发情形：
1. 收货后超72小时未进行复苏操作
2. 自行更换非平滑肌专用培养基导致功能丧失
3. 未按推荐胶原包被培养表面引发细胞去分化
4. 未进行传代前污染检测直接开展共培养实验
注：所有操作需在生物安全二级实验室进行，建议定期进行平滑肌肌球蛋白重链表达检测以确认细胞特性。
