一、细胞基本属性
- 细胞名称：人结肠粘膜上皮细胞（Human Colonic Mucosal Epithelial Cells）
- 细胞别称：HCMEC；结肠上皮细胞；肠粘膜上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无胃肠道疾病史）
- 组织来源：结肠粘膜层（经内镜活检或手术切除组织分离）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或基质胶包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺展，接触抑制后呈规则多角形或铺路石样排列
- 细胞代数：P3 - P8（经功能性验证，确保增殖与分化特性稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：专用结肠上皮细胞培养基（含EGF、B27等生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约48 - 60小时（依赖培养密度及生长因子补充）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀；培养瓶：酒精消毒表面后静置培养箱4小时恢复代谢。
- 传代标准：融合度达80% - 90%时传代（通常每3 - 4天一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（建议初始接种密度为1×10^4 cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项：避免消化过度损伤细胞极性；传代后12小时内更换培养基以移除死细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 2×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤：离心后重悬细胞于冻存液，分装至冻存管；程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮储存。
- 复苏验证：复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）；功能性验证：黏液蛋白分泌检测或紧密连接蛋白（ZO - 1）免疫荧光鉴定。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程中温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）；
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）；
3. 细胞复苏后活力低于90%；
4. 细胞STR鉴定与描述不符。
- 不予重发情形：
1. 超时复苏（超过到货72小时未处理）；
2. 使用非指定培养基或未按规范传代；
3. 实验操作不当导致细胞污染或功能丧失；
4. 未留存冻存备份导致细胞耗尽。
