一、细胞基本属性
- 细胞名称：人小肠平滑肌细胞（Human Small Intestinal Smooth Muscle Cells）
- 细胞别称：HISMC；小肠平滑肌细胞；肠平滑肌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无消化道疾病史）
- 组织来源：小肠组织平滑肌层
- 生长特性：贴壁生长（依赖纤维连接蛋白或胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤形，平行排列呈束状，接触抑制后保持致密单层
- 细胞代数：P3 - P8（保证收缩功能与表型稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Smooth Muscle Cell Medium（含5% FBS + 生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~60 - 72小时（依赖培养密度与基质包被条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基混匀离心
- 培养瓶：75%酒精擦拭后静置培养箱4小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每5 - 7天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞间连接松解后立即终止
- 注意事项：
- 避免机械吹打过度（平滑肌细胞对剪切力敏感）
- 传代后48小时内避免换液以维持细胞黏附稳定性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 转入液氮
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥90%）
- 功能验证：钙离子荧光探针检测（P5代细胞应维持钙瞬变响应能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度失控导致细胞死亡（需提供干冰状态照片）
2. 3天内证实支原体/细菌污染（需提供电泳检测结果）
3. 细胞活力低于85%（台盼蓝染色法）
4. 免疫荧光鉴定平滑肌肌动蛋白（α - SMA）阴性
- 不予重发情形：
1. 客户延迟复苏超过48小时
2. 使用非专用培养基导致细胞去分化
3. 未采用胶原包被培养器皿影响细胞贴附
4. 未按规范进行细胞收缩功能检测即开展实验
