一、细胞基本属性
细胞名称:人小肠粘膜上皮细胞(Human Small Intestinal Mucosal Epithelial Cells)
细胞别称:HIMEC;小肠上皮细胞;肠粘膜上皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
组织来源:小肠粘膜组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)
细胞形态:单层柱状或立方状,表面可见微绒毛结构
细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含5% FBS+上皮细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖细胞密度与基质类型)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡温湿度
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含钙离子螯合剂)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
注意事项:
- 避免机械刮取损伤细胞基底膜完整性
- 传代后6小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 预冷冻存管,细胞悬液分装后立即进行梯度降温
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞贴壁率(标准≥85%)
- 功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P5代细胞应维持分化特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线)
2. 到货48小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞存活率低于85%(台盼蓝染色法复检确认)
4. 基因表达谱检测与说明书不符
不予重发情形:
1. 未按推荐方法进行基质包被导致贴壁失败
2. 自行修改培养基配方影响细胞增殖
3. 超时培养导致细胞过度分化
4. 未执行规范化的污染防控措施