一、细胞基本属性
细胞名称:人胃成纤维细胞(Human Gastric Fibroblasts)
细胞别称:HGF;胃部成纤维细胞;胃间质成纤维细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无消化道疾病史)
组织来源:胃组织黏膜下层或间质
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质附着)
细胞形态:典型长梭形或星形,呈放射状排列
细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与血清浓度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基混匀离心后重悬接种
• 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱2小时平衡后换液
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
• 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙扩大后终止
注意事项:
• 避免消化过度(损伤细胞膜完整性)
• 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及血清替代保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
• 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
• 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:
• 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
• 功能验证:细胞增殖能力检测(P5代细胞应维持正常生长曲线)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰包装状态证明)
2. 3天内证实支原体/细菌污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏后细胞活力低于85%(台盼蓝染色法)
4. STR鉴定结果与宣传信息不符
不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过72小时未处理冻存管
2. 使用非推荐培养基或添加未经验证的生长因子
3. 反复冻融导致细胞膜损伤或功能丧失
4. 未按规范进行无菌操作引发交叉污染
(注:以上内容基于标准实验条件,实际应用需根据具体研究需求优化参数。)