一、细胞基本属性
1. 细胞名称：人食管上皮细胞（Human Esophageal Epithelial Cells）
2. 细胞别称：HEEC；食管上皮细胞；食管黏膜上皮细胞
3. 种属来源：人（Homo sapiens）
4. 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无食管疾病史）
5. 组织来源：食管黏膜组织
6. 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
7. 细胞形态：典型铺路石样单层，紧密连接排列，接触抑制后呈多边形
8. 细胞代数：P3 - P8（维持上皮细胞分化特性与屏障功能）
9. 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：Epithelial Cell Medium（含5% FBS+表皮生长因子添加剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~48 - 60小时（依赖培养密度与基质包被条件）
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基混匀离心
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱4小时平衡
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代一次）
3. 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
5. 注意事项
- 避免机械吹打（保护细胞间紧密连接结构）
- 传代后12小时更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞后重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 20min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 转入液氮
4. 复苏验证
- 复苏后48小时免疫荧光检测角蛋白表达（确认上皮特性）
- 功能验证：跨膜电阻值测定（P5代细胞应维持＞200 Ω·cm²）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
- 7天内证实真菌/支原体污染（需提供电镜或PCR检测结果）
- 细胞贴壁率低于85%（需提供接种后24小时显微照片）
- 细胞角蛋白免疫鉴定未通过
2. 不予重发情形
- 客户未使用专用包被培养瓶导致细胞脱落
- 擅自添加分化诱导剂影响细胞特性
- 未按时换液引发培养基酸化变质
- 未按手册要求进行预包被处理
注：以上参数基于标准实验条件，实际应用需根据具体研究需求优化。
