一、细胞基本属性
1. 细胞名称
人主动脉外膜成纤维细胞（Human Aortic Adventitial Fibroblasts）
2. 细胞别称
HAAF；主动脉外膜成纤维细胞；血管外膜细胞
3. 种属来源
人（Homo sapiens）
4. 年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无心脑血管疾病史）
5. 组织来源
主动脉外膜组织层（经显微分离获取）
6. 生长特性
贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
7. 细胞形态
长梭形或多角形，胞质延展明显，核质比适中
8. 细胞代数
P3 - P8（经严格筛选确保功能稳定性与低传代变异）
9. 细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基
Fibroblast Growth Medium（含5% FBS + 成纤维细胞特异性添加剂）
11. 培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间
~48 - 72小时（依赖培养密度与基质包被条件）
14. 供应限制
仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基混匀离心去冻存液
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁后静置培养箱2小时平衡
2. 传代标准
细胞融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代一次）
3. 传代比例
1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
5. 注意事项
- 避免消化过度（损伤细胞外基质结合位点）
- 首次换液时间建议在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代保护剂）
2. 细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
- 梯度降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%为合格标准）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光检测（P5代细胞应维持典型成纤维细胞表型）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录证明）
- 到货3日内经PCR检测证实支原体或细菌污染
- 复苏后细胞贴壁率低于80%（需提供显微影像记录）
- 细胞STR谱系与数据库不符
2. 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过48小时
- 自行更换培养基导致细胞增殖异常
- 未按规范进行胶原包被引发细胞脱落
- 未执行推荐传代密度导致提前衰老
