一、细胞基本属性
细胞名称
人肝动脉平滑肌细胞(Human Hepatic Artery Smooth Muscle Cells)
细胞别称
HASMC;肝动脉平滑肌细胞;动脉中膜平滑肌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无血管疾病史)
组织来源
肝动脉中膜平滑肌层
生长特性
贴壁生长(依赖胶原或纤维连接蛋白包被)
细胞形态
长梭形或纺锤状,融合后呈平行束状排列
细胞代数
P3 - P8(维持收缩表型及功能稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
平滑肌细胞专用培养基(含5% FBS + TGF - β1及PDGF - BB生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间
~72 - 96小时(依赖细胞密度及生长因子浓度)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基混匀后离心去除冻存液。
培养瓶:75%酒精擦拭外壁,静置于培养箱2小时平衡后换液。
传代标准
细胞融合度达90% - 95%(建议每5 - 7天传代一次)。
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)。
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶),37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止。
注意事项
避免剧烈吹打(防止收缩蛋白损伤);传代后48小时内避免换液以稳定细胞贴壁。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)。
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
冻存步骤
离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管;梯度降温:4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存。
复苏验证
复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%);功能验证:α - SMA免疫荧光染色及钙离子流检测(P5代细胞应保持收缩功能)。
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);
2. 7天内证实微生物污染(需提供检测报告);
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供培养48小时显微图像);
4. 细胞标志物表达与说明书不符。
不予重发情形
1. 超时复苏(冻存管解冻后未及时接种);
2. 使用非推荐包被基质导致细胞脱壁;
3. 未按规范进行细胞功能验证即开展实验;
4. 自行传代超过P10代后出现表型丢失。