一、细胞基本属性
- 细胞名称:人肝动脉内皮细胞(Human Hepatic Artery Endothelial Cells)
- 细胞别称:HHAEC;肝动脉内皮细胞;肝内皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肝脏疾病史)
- 组织来源:肝动脉组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质成分)
- 细胞形态:典型“铺路石样”单层排列,接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Endothelial Cell Medium(含2% FBS + 内皮细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基混匀后离心接种。
- 培养瓶:75%酒精擦拭外壁,静置培养箱2小时平衡后换液。
- 传代标准:细胞融合度达85% - 90%(通常每3 - 4天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度5×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.05% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺),37℃消化1 - 2分钟,镜下观察细胞收缩变圆后立即终止。
- 注意事项:避免过度消化(防止损伤细胞间连接蛋白);传代后24小时更换培养基以去除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥95%);功能验证:Transwell实验检测P5代细胞屏障完整性。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰状态照片);
2. 3天内证实支原体/细菌污染(需提供PCR检测报告);
3. 细胞活力低于90%(台盼蓝染色法);
4. STR鉴定与宣传不符。
- 不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过72小时;
2. 使用非推荐培养基导致细胞状态异常;
3. 反复冻融操作引起细胞损伤;
4. 未按规范进行支原体检测即开展实验。