一、细胞基本属性
- 细胞名称：人动脉外膜成纤维细胞（Human Adventitial Fibroblasts）
- 细胞别称：HAF；动脉外膜成纤维细胞；血管外膜细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：动脉外膜层（分离自正常动脉组织）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：长梭形或星形，贴壁伸展后呈不规则分支状
- 细胞代数：P3 - P8（推荐使用代数以确保功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖血清浓度及细胞密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后，静置于培养箱内平衡2小时。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺），37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化。
- 注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞膜损伤）。
- 传代后需轻柔离心去除消化液残留，首次换液建议在48小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后重悬于冻存液，分装至冻存管。梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时内检测细胞存活率（台盼蓝染色法，存活率≥90%）。
- 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应维持正常分泌功能）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程中温度记录异常导致细胞死亡（需提供物流温度监控证明）。
2. 收货后72小时内证实微生物污染（需提供检测报告）。
3. 复苏后细胞存活率低于90%（需提供台盼蓝染色结果）。
4. 细胞STR谱系与数据库不符。
- 不予重发情形：
1. 未按说明书要求进行细胞复苏或培养（如延迟复苏超48小时）。
2. 自行更换培养基导致细胞状态异常。
3. 未进行梯度降温直接冻存造成细胞损伤。
4. 实验操作污染未及时反馈导致结果不可追溯。
