一、细胞基本属性
细胞名称
人颈动脉平滑肌细胞（Human Carotid Artery Smooth Muscle Cells）
细胞别称
HCSMC；颈动脉平滑肌细胞；动脉肌细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
组织来源
颈动脉中膜层（经酶消化法分离）
生长特性
贴壁生长（依赖纤维连接蛋白包被基质）
细胞形态
典型长梭形，呈“峰谷”样排列，融合后呈束状结构
细胞代数
P3 - P8（推荐使用代数，确保收缩功能与标志物表达稳定性）
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
平滑肌细胞专用培养基（含5% FBS+成纤维生长因子+胰岛素）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
约48 - 72小时（受血清浓度及细胞密度影响）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶：酒精擦拭表面后静置培养箱1小时平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（建议每4 - 5天传代）
传代比例
1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
• 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02%胶原酶）
• 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞脱离
注意事项
• 消化后需离心去除酶残留（避免影响后续功能实验）
• 传代后48小时内避免频繁观察（减少机械应力干扰）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
• 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期存储
复苏验证
• 复苏后48小时检测细胞活力（台盼蓝染色存活率≥90%）
• 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞阳性率需＞95%）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中温度记录异常（需提供物流温度监控证明）
2. 7天内证实支原体污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞标志物表达异常（需提供Western Blot或流式数据）
4. 细胞复苏后活力＜85%（按台盼蓝染色结果判定）
不予重发情形
1. 未使用配套培养基导致细胞去分化
2. 未按规范进行胶原酶辅助消化引发细胞损伤
3. 液氮保存设备故障导致细胞反复冻融
4. 未在指定代数范围内使用细胞（超出P8代）
