一、细胞基本属性
细胞名称
人冠状动脉平滑肌细胞(Human Coronary Artery Smooth Muscle Cells)
细胞别称
HCASMC;冠状动脉SMC;冠状血管平滑肌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无心脑血管疾病史)
组织来源
冠状动脉中膜层分离
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
长梭形或纺锤状,平行排列生长
细胞代数
P3 - P8(保证收缩功能与表型稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS + 血管平滑肌特异性生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~60 - 72小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶:酒精消毒表面后静置培养箱4小时再换液
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每4 - 5天传代)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
• 消化终止时需加入含血清培养基中和
• 传代后48小时内避免频繁观察以防机械扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心后缓慢滴加冻存液混匀
• 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 12h → 液氮保存
复苏验证
• 复苏后48小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)
• 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞阳性率>95%)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程超温导致细胞失活(需提供温度记录证明)
2. 7天内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(提供显微照片佐证)
4. 特异性标志物表达不达标
不予重发情形
1. 未按说明书进行胶原包被导致贴壁失败
2. 擅自添加非推荐生长因子改变细胞表型
3. 使用机械刮除法传代造成细胞损伤
4. 未定期进行肌动蛋白染色验证细胞特性