一、细胞基本属性
- 细胞名称：人冠状动脉内皮细胞（Human Coronary Artery Endothelial Cells）
- 细胞别称：HCAEC；冠状动脉内皮细胞；心脏血管内皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：冠状动脉血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：典型单层铺路石状排列，接触抑制后呈现规则多角形
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性与遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Growth Medium（含5% FBS+血管内皮生长因子复合添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃恒温；湿度：95%恒湿
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮气相长期保存
- 倍增时间：约48 - 60小时（受培养密度及细胞外基质影响）
- 供应限制：仅用于体外研究，禁止临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管接收后立即37℃水浴解冻，加入5mL预温培养基轻柔混匀离心
- 培养瓶收货后酒精消毒表面，静置培养箱平衡1小时再观察
传代标准
融合度达80% - 90%时进行传代（通常培养3 - 4天）
传代比例
建议1:2至1:3分瓶（推荐初始密度4×10³ cells/cm²）
消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含酚红指示剂）
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项
- 严格控制消化时间，避免VE - cadherin连接蛋白降解
- 传代后12小时内避免移动培养瓶，24小时更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO + 海藻糖保护剂）
细胞密度
1.5×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL（离心后重悬体积控制）
冻存步骤
- 梯度降温程序：4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮长期存储
- 全程操作需在冰上进行，冻存管标注代次及冻存日期
复苏验证
- 复苏后48小时内完成活率检测（台盼蓝拒染率≥90%）
- 功能验证：CD31免疫荧光染色及LDL摄取实验（P5代细胞应保持特性）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 干冰运输期间温度记录异常（需提供物流温度监控截图）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需第三方检测报告）
3. 细胞复苏活率未达承诺标准（需提供台盼蓝染色视频）
4. 细胞STR图谱与数据库不匹配
不予重发情形
1. 细胞解冻后存放超过48小时未接种
2. 自行修改培养基配方导致功能异常
3. 未使用指定胶原包被培养器皿
4. 实验操作不当引发交叉污染
注：本产品需配合专用细胞培养试剂盒使用，详细操作视频可登录官网技术支持页面获取。
