一、细胞基本属性
细胞名称:人心脏微血管内皮细胞(Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells)
细胞别称:HCMVEC;心肌微血管内皮细胞;心内膜细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别均衡筛选,供体无心血管疾病史)
组织来源:心肌组织微血管网
生长特性:严格贴壁生长(需包被纤维连接蛋白基质)
细胞形态:单层镶嵌式铺展,接触抑制后呈现规则多角形
细胞代数:P3 - P8(经端粒酶活性检测确认增殖潜能)
细胞规格:1×10^5活细胞/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清保护剂)
培养基:专用内皮细胞完全培养基(含5%胎牛血清及VEGF生长因子)
培养条件:恒温37℃、5% CO₂环境,相对湿度95%恒定
冻存条件:程序降温后液氮保存(无血清冻存体系含10%DMSO)
倍增时间:约48 - 60小时(基质依赖性生长曲线验证)
应用限制:限于体外研究,禁止临床移植或基因改造实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存细胞立即复苏:37℃水浴轻摇解冻,预温培养基梯度稀释
- 贴壁细胞直接培养:酒精消毒瓶口后静置4小时再换液
传代标准:
- 融合度达90%时传代(每72小时监测汇合度)
- 建议使用0.25%胰酶消化(含0.02% EDTA)
传代流程:
- 消化时间控制在90秒内(37℃预处理)
- 终止时加入含血清培养基中和酶活性
- 推荐接种密度为1×10⁴ cells/cm²
关键注意:
- 维持细胞外基质完整性(建议使用胶原包被培养器皿)
- 传代后48小时进行首次换液(保留自分泌生长因子)
三、细胞冻存操作规范
冻存准备:
- 冻存液配方:无血清冻存基料 + 10% DMSO + 5%海藻糖
- 最佳冻存密度:2×10⁶ cells/mL(离心后重悬)
程序控制:
- 梯度降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储
- 冻存管标注:细胞代次、冻存日期、操作者代码
质控标准:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法验证)
- 功能检测:血管形成实验(Matrigel基质验证P5代功能)
四、售后服务承诺
质量保障:
- 提供STR图谱鉴定报告(18个基因座完全匹配)
- 随附支原体检测阴性证明(PCR法检测)
重发条款:
- 到货72小时内发现污染(需提供微生物检测证据)
- 细胞复苏存活率低于85%(附显微影像记录)
- 运输过程冷链中断(需提供温度记录曲线)
免责声明:
- 客户自行修改培养方案导致的表型改变
- 未按规程进行定期传代造成的衰老累积
- 使用非指定培养基导致的功能异常
- 超过建议代次继续扩增引发的遗传漂变
注:本产品符合国际细胞库标准(ICLAC认证),所有操作均需在二级生物安全柜内完成,建议定期进行CD31/vWF免疫荧光鉴定以确认内皮特性。