一、细胞基本属性
细胞名称:人心肌成纤维细胞(Human Cardiac Fibroblasts)
细胞别称:HCF;心肌间质细胞;心脏成纤维细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无心脑血管疾病史)
组织来源:心脏组织心肌间质
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或星形,胞质伸展明显
细胞代数:P3 - P8(经功能验证确保活性与表型稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS + 碱性成纤维细胞生长因子)
培养条件:气相为5% CO₂,恒温37℃,湿度95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(依赖细胞密度及培养条件)
供应限制:仅限于科学研究,禁止临床治疗或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管需37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶经酒精消毒后静置培养箱平衡1小时再观察
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代)
传代比例:1:2至1:4(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
- 严格控制消化时间防止细胞外基质损伤
- 传代后12小时需补充新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及血清替代物)
细胞密度:推荐1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心后缓慢加入预冷冻存液重悬
- 程序降温:4℃平衡30分钟, - 80℃过夜后转液氮储存
复苏验证:
- 复苏后12小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:胶原分泌能力检测(P5代细胞应保持正常分泌水平)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 收到后72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞存活率低于承诺标准(经第三方检测确认)
4. 细胞STR分型与备案数据不符
不予重发情形:
1. 未按操作指南导致细胞状态异常
2. 使用非指定培养基或实验耗材
3. 收到后超72小时未进行规范复苏
4. 自行改良培养方案引发的功能异常