一、细胞基本属性
- 细胞名称:人肺微血管周细胞(Human Pulmonary Microvascular Pericytes)
- 细胞别称:HPMvPericytes;肺微血管周细胞;肺间质周细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肺部疾病史)
- 组织来源:肺组织微血管周围间质
- 生长特性:贴壁生长(依赖特定细胞外基质包被)
- 细胞形态:典型长梭形或星状,具分支状突起
- 细胞代数:P3 - P6(维持功能稳定性与表型特征)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Pericyte Growth Medium(含5% FBS + 周细胞专用添加因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖基质包被与培养密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热的培养基低速离心(200×g,5分钟)后重悬接种。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时,再更换新鲜培养基。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶),37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:
- 避免机械刮取(防止损伤细胞突起结构)。
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少机械扰动。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,分装至冻存管。
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)。
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P4代细胞应保持标志物阳性率≥95%)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明)。
2. 3日内证实支原体污染(需提供第三方检测报告)。
3. 细胞复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)。
4. 标志物鉴定与宣传不符(如NG2或PDGFR - β阴性)。
- 不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过48小时。
2. 使用非推荐培养基或未按规范包被培养皿。
3. 自行改良冻存液导致细胞损伤。
4. 未进行污染检测直接用于共培养实验。