一、细胞基本属性
- 细胞名称:人肺成纤维细胞(Human Lung Fibroblasts)
- 细胞别称:HLF;肺间质成纤维细胞;肺基质细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体经病理学确认无肺部纤维化病变)
- 组织来源:肺组织间质分离培养
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型长梭形或星状,具备伪足延伸特征
- 细胞代数:P3 - P10(经端粒酶活性检测确认增殖潜能)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T75培养瓶 或 1.5mL冻存管(含专用保护液)
- 培养基:Fibroblast Growth Medium(含10% FBS + 成纤维细胞特异性生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含程序性降温保护剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(与细胞密度及传代次数相关)
- 应用限制:适用于体外纤维化模型构建,禁止用于人体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管复苏:37℃水浴震荡解冻,离心去除冻存液后重悬接种
- 贴壁维持:首次换液需在接种后48小时内完成
传代标准
融合度达90% - 95%时传代(接触抑制明显时需及时处理)
传代比例
1:3至1:4(建议初始密度2×10⁴ cells/cm²)
消化方法
- 预温0.25%胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,离心转速建议1200rpm
关键注意
- 传代间隔不超过7天
- 需定期检测α - SMA表达确认表型稳定性
- 避免频繁换液导致的机械应力损伤
三、细胞冻存操作规范
冻存准备
选择对数生长期细胞(传代后48小时为最佳)
冻存液配方
无血清冻存液(含7.5% DMSO + 海藻糖保护体系)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁶ cells/mL(单支冻存管建议1mL体积)
程序控制
- 程序降温仪梯度冷冻:-1℃/min至 - 80℃
- 液氮储存前需完成气相平衡
质控指标
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 冻存后胶原分泌能力检测(Ⅰ型胶原ELISA验证)
四、售后服务承诺
- 细胞鉴定:STR分型检测(提供16位点基因图谱),波形蛋白免疫荧光鉴定(≥98%阳性率)
- 污染控制:支原体检测(培养法 + PCR法双重验证),微生物检测(需氧/厌氧菌培养14天)
- 技术支持:专业团队提供细胞培养问题诊断,应用文献数据库共享服务
- 售后时效:质量问题受理后24小时内响应,检测结果争议复检周期≤7个工作日
- 注:本产品符合国际细胞库采集标准,所有操作均遵照ISO细胞培养指南执行,实验数据可溯源性完整