一、细胞基本属性
- 细胞名称：人气管平滑肌细胞（Human Tracheal Smooth Muscle Cells）
- 细胞别称：HTSMC；气道平滑肌细胞；支气管平滑肌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无呼吸道疾病史）
- 组织来源：气管组织中段平滑肌层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：长梭形，融合后呈束状平行排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保收缩功能与表型稳定性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Smooth Muscle Cell Medium（含5% FBS + 胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（与培养基补充因子相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外壁，静置培养箱4小时再观察贴壁
- 传代标准：细胞密度达80% - 90%（建议每4 - 5天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.05%胰酶 - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落
- 注意事项：
- 避免机械刮取损伤细胞膜完整性
- 传代后48小时需检测α - SMA表达以确认表型
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬于预冷冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：钙离子荧光探针检测收缩响应（P5代细胞需维持乙酰胆碱敏感性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测报告）
3. 细胞标志物（如Calponin）表达阴性
4. STR比对结果不符
- 不予重发情形：
1. 未按说明书进行胶原包被培养
2. 自行更改培养基导致功能异常
3. 冻存管多次解冻或长期 - 20℃存放
4. 未进行钙离子信号通路验证即质疑细胞活性
