一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠羊膜间充质干细胞(Mouse Amniotic Mesenchymal Stem Cells)
细胞别称:MAMSCs;羊膜间充质干细胞;羊膜干细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄来源:孕中期胎鼠(供体筛选无遗传缺陷及病原体感染史)
组织来源:羊膜组织(无菌剥离后经胶原酶消化分离)
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或成纤维样,单层贴壁后呈放射状排列
细胞代数:P3 - P8(维持干细胞特性及多向分化潜能)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12+10% FBS+1%双抗+5ng/mL bFGF
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
增殖能力:~24 - 48小时(视接种密度及培养基活性)
应用限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴解冻后转移至15mL离心管,加5mL培养基离心去冻存液;培养瓶:酒精消毒外壁后直接置于37℃培养箱静置4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁细胞脱落后终止消化
注意事项:传代时保留少量条件培养基以维持干细胞特性;避免频繁观察影响贴壁效率,首次换液需在接种后12小时进行
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液;程序降温:4℃平衡30分钟→冻存盒 - 80℃过夜→转入液氮长期保存
复苏验证:复苏后活率≥90%(台盼蓝染色法);功能验证:三系分化潜能检测(成骨/成脂/成软骨诱导实验)
四、售后服务承诺
重发标准:1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供全程温控记录);2. 到货3日内经PCR证实支原体污染;3. 流式检测CD90/CD44阳性率低于95%;4. 细胞活率低于85%(需提供台盼蓝染色影像)
免责条款:1. 收到细胞后超72小时未进行复苏操作;2. 自行改用无血清或非推荐培养基培养;3. 未按规范进行诱导分化导致细胞特性改变;4. 实验污染后未及时沟通擅自处理