一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠眼外肌成纤维细胞(Mouse Extraocular Muscle Fibroblasts)
细胞别称:EOM Fibroblasts;眼外肌成纤维细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无眼部疾病史)
组织来源:眼外肌组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或星形,贴壁后呈放射状排列
细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与增殖活性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS+1%成纤维细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~36 - 48小时(依赖培养密度与血清浓度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀
培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
消化时轻拍培养瓶加速细胞脱落,避免机械损伤
传代后12小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
消化后离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
程序降温:4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:
复苏后活率≥90%(台盼蓝染色法)
功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认肌成纤维细胞特性
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供冷链记录)
2. 7天内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞复苏活率低于85%(需提供染色证据)
4. 种属鉴定结果与描述不符
不予重发情形:
1. 解冻后未在48小时内接种
2. 使用非推荐包被材料导致贴壁失败
3. 自行修改培养基配方引发细胞分化异常
4. 未进行无菌操作造成二次污染